Racionální inženýrství spektrálních vlastností zeleného fluorescenčního proteinu z renily fialové

Ročník: 48 (2025/26)

Kategorie: 5: molekulární biologie

2. místo

Hlavním cílem této práce je změna barvy světla emitovaného při fluorescenci RGFP z původní zelené na žlutou za zachování fyzické interakce mezi RGFP a RLuc8. Pro splnění tohoto cíle bylo stanoveno několik dílčích úkolů:\• Provedení literární rešerše ohledně principů luminiscence s důrazem na fluorescenci a bioluminiscenci, bioluminiscenčního systému Renilla reniformis a strategii při mutagenezi fluorescenčních proteinů.\• Návrh mutace či mutací proteinu RGFP na základě dostupné literatury, informací v databázích a vlastní bioinformatické analýzy sekvence a struktury proteinu RGFP s cílem změnit barvu fluorescence RGFP ze zelené na žlutou.\• Molekulárně-biologická realizace a rekombinantní produkce navrženého proteinu RYFP včetně optimalizace procesu jeho purifikace.\• Stanovení základních fyzikálně-chemických vlastností připraveného proteinu RYFP, zejména termostability, velikosti, a také intenzity a emisního a excitačního spektra jeho fluorescence, a parametry jeho interakce s RLuc8.\

Plný text práce